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Lugar de origen: | China |
---|---|
Nombre de la marca: | Green Spring |
Certificación: | ISO13485,ISO9001 |
Número de modelo: | LSY-10034 |
Cantidad de orden mínima: | 1kit |
Precio: | negotiable |
Tiempo de entrega: | 7~14days |
Condiciones de pago: | T/T |
Capacidad de la fuente: | 100000 pruebas por día |
Especificación: | 96 Wells/equipo | Sensibilidad: | 0,1 ppb |
---|---|---|---|
Tarifa del reacción cruzado: | Ocratoxina A 100% | Tiempo de la incubadora: | 30min~30min~15min |
Funcionamiento de la muestra: | Alimentación, grano | Vida útil: | 12 meses; la fecha de la producción está en la caja |
Palabras claves: | Ocratoxina A (OTA) ELISA Test Kit | Tipo: | Equipos de prueba de la micotoxina |
Resaltar: | equipo rápido de la prueba de la micotoxina del grano 15min,sensibilidad rápida 0,1 Ppb del equipo de la prueba de la micotoxina |
Ocratoxina ELISA Test Kit para el grano de alimentación 96 Wells/Kit Sensitivity 0,1 ppb
1. Principio y uso
La ocratoxina es un metabilito secundario producido por cierta especie del género aspergillus y penicillium. Entre ellos, la ocratoxina A es distribuido lo más extensamente posible en naturaleza y tiene la toxicidad más fuerte, y tiene el impacto más grande en seres humanos, animales y plantas.
El equipo utiliza ELISA competitivo indirecto para detectar la ocratoxina (ocratoxinas A, OTA) en cereales y muestras de la alimentación tales como tallarines de arroz, cacahuetes, y sojas. El equipo consiste en la placa del antígeno y conjugación cubierta primero de la enzima, los anticuerpos, los estándares y otros reactivo favorables. Durante la prueba, el estándar o la solución de la muestra se añade, la ocratoxina en la muestra y el antígeno cubierto primero en la placa para competir contra el anticuerpo de la ocratoxina, y después de añadir la conjugación de la enzima, vía el color de la demostración del substrato de TMB, los valores de la absorción de la muestra de la ocratoxina tienen una correlación negativa con su contenido, comparado con la curva estándar y entonces multiplicado por la correspondencia el factor del dilución, puede dibujar el contenido de la ocratoxina en muestras.
2. Especificaciones técnicas
Sensibilidad: 0.1ppb (ng/ml)
Incubación: 37℃, 30min~30min~15min
Límite de detección:
Grano 1ppb
Alimentación 2ppb
Tarifa del reacción cruzado
Ocratoxina A 100%
Tarifa de recuperación:
Grano, alimentación el 85±15%
3. Componentes
1 | Tiras micro-bien de OTA | 12 tiras con 8 pozos desprendibles por cada uno | |
2 | solución estándar 6× (1 ml cada uno) | 0ppb | 0.1ppb |
0.3ppb | 0.9ppb | ||
2.7ppb | 8.1ppb | ||
3 | Conjugación de la enzima | 11ml | casquillo rojo |
4 | Solución de funcionamiento del anticuerpo | 5.5ml | casquillo azul |
5 | Substrato A | 6ml | casquillo blanco |
6 | SubstrateB | 6ml | casquillo negro |
7 | Pare la solución | 6ml | casquillo amarillo |
8 | 20X concentró el almacenador intermediario que se lavaba | 40ml | casquillo blanco |
9 | Instrucción | 1 pedazo |
4. Materiales requeridos pero no proporcionados
1) Equipo: Lector de ELISA (450nm/630nm), impresora, vórtice (coctelera opcional), centrifugadora, balanza: 0.01g cantidad sensible, pipetas graduadas, homogeneizador;
2) micropipetas: 20ml monocanal ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, 300ml de varios canales.
3) reactivo: Metanol, ₃ de NaHCO, agua desionizada.
5. Tratamiento previo de la muestra
5,1 preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:
1) 70%Methanol
7 porciones de metanol + 3 porciones de agua desionizada;
2) solución del ₃ de los 0.1M NaHCO
Pese el ₃ de 4.2g NaHCO, añada el agua desionizada para disolver a 500ml;
3) almacenador intermediario que se lava
1 porción de 20X concentró el almacenador intermediario que se lavaba y disuelve con 19 porciones de agua desionizada para obtener el almacenador intermediario que se lavaba listo para utilizar.
5,2 ofGrain de la preparación (arroz, maíz, mijo etc.)
1) pesa la muestra homogénea 2g en un tubo de centrífuga 50ml, añade el metanol de 10ml el 70%, sacudida para 5min, centrifugadora en 4000 r/min en la temperatura ambiente para 10min;
2) toma el líquido claro de la para arriba-capa 1ml, añade la solución del ₃ de 1ml los 0.1M NaHCO, sacude a uniformemente;
3) toma el líquido 50ul para probar
Factor del dilución: Límite de detección 10: 1ppb
5,3 preparación de la alimentación
1) pesa la muestra homogénea 2g en un tubo de centrífuga 50ml, añade el metanol de 20ml el 70%, sacudida para 5min, centrifugadora en 4000 r/min en la temperatura ambiente para 10min;
2) toma el líquido claro de la para arriba-capa 1ml, añade la solución del ₃ de 1ml los 0.1M NaHCO, sacude a uniformemente;
3) toma el líquido 50ul para probar
Factor del dilución: Límite de detección 20: 2ppb
6. Procedimientos de ELISA
1) trae el equipo de la prueba al minuto 30 de la temperatura ambiente (℃ 20-25) por lo menos, el almacenador intermediario concentrado 20X del lavado puede tener cristalización cuando tienda en el frío, necesidad de volver a la temperatura ambiente para disolver totalmente; observe que cada reactivo se debe sacudir uniformemente antes de usar; Ponga las tiras micro-bien requeridas en marcos de la placa. Reselle el microplate inusitado, tienda en el ℃ 2-8, no congelado.
2) enumeración: número los micro-pozos según muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar se deben realizar dos veces; registre sus posiciones.
3) añade estándar/la muestra: Añada el µL 50 de la muestra o la solución estándar en pozos duplicados separados, después añada la solución de funcionamiento del anticuerpo, 50µL/well. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, sello el microplate con la membrana de la cubierta, incube en 37℃ para el minuto 30 en la oscuridad.
4) microplate del lavado: Abra cuidadosamente el membrance de la cubierta, vierten el líquido fuera de microwell; añada 350 µL/well del almacenador intermediario del lavado, lávese completamente por 5 veces, 30s cada vez, después saque y agite para secarse con el papel absorbente. (Utilice la lanza inusitada para perforar la burbuja después de seco)
5) añade la conjugación de la enzima: añada la conjugación de la enzima, 100 µL/well. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, sello el microplate con la membrana de la cubierta, incube en el minuto de 37℃ for30 en la oscuridad.
Lavado como paso 4).
6) coloración: añada el µL 50 del substrato A entonces el substrato B de 50 µL en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, andincubate en 37℃ para el minin 15 el oscuro para la coloración. (Si el color azul es demasiado ligero, el tiempo de reacción puede ser extendido apropiadamente)
7) determinación: añada 50 que el µL del para la solución en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente. Fije la longitud de onda del lector del microplate en 450nm para determinar el valor del OD de cada pozo. (Recomiende leer el valor del OD en la dual-longitud de onda 450/630nm en el plazo del minuto 10).
7. Juicio del resultado
Para calcular la concentración de muestras, una curva estándar debe ser hecha. Antes de que se haga la curva estándar, el concepto de % de la absorción debe ser sabido.
Cálculo de % de la absorción:
Porcentaje del valor de la absorción = | B | el ×100% |
B0 |
Valor del OD de la media de B-the de la muestra o de la solución estándar.
Valor del OD de la media de B0-the de las 0 soluciones estándar de ng/mL.
El estándar cero así se hace igual hasta el 100% y los valores de la absorción se citan en porcentajes. Los valores calculaban para los estándares se entran en un sistema de coordenadas en el papel cuadriculado semilogarithmic contra la concentración de la ocratoxina A [μg/kg]. La concentración de la ocratoxina A en μg/kg (ppb) correspondiente a la absorción de cada muestra se puede leer en la curva de calibración.
Un software especial para el análisis del resultado de ELISA facilitará determinaciones dobles o múltiples. Si usted necesita, llame por favor para pedir.
8. Precauciones
1) la temperatura ambiente debajo del ℃ 25 o la temperatura de los reactivo y de las muestras que no son vueltos a la temperatura ambiente (℃ 25) llevará a un valor estándar más bajo del OD.
2) la sequedad del microplate en el proceso que se lava será acompañada por las situaciones incluyendo las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable; continúe tan al paso siguiente inmediatamente después del lavado.
3) mezcla uniformemente antes de añadir cualesquiera reactivo.
4) la solución de la parada es la solución ácida sulfúrica de 2 M, evita entrar en contacto con con la piel.
5) no utiliza el equipo que excede su fecha de vencimiento. El uso de reactivo diluidos o adulterados de los equipos llevará a los cambios en la sensibilidad y los valores de detección del OD. No intercambie los reactivo de los equipos de diversos números de lote para utilizar.
6) almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado. Ponga el microplate inusitado en un bolso del auto-lacre para resellarlo. La sustancia estándar y el color descolorido anteriores es sensibles a la luz, y no pueden ser expuestos así directamente a la luz.
7) desecha la solución de la coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución. El valor de detección (450/630nm) de las 0 soluciones estándar (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0>
9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento
Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.
Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.
Q1: ¿Cuándo será enviado?
A1: Enviaremos las mercancías para usted cuanto antes en el plazo de 7 días laborables después de recibir el pago. (En caso de factores externos tales como la epidemia, la entrega puede ser retrasada)
Q2: ¿Apoya OEM/ODM?
A2: Puede ser apoyado, pero la cantidad específica necesita ser más de 100.000 pedazos, que es conveniente para los productos modificados para requisitos particulares.
Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Nacionalmente hemos certificado ISO9001 e ISO13485. Nuestro proceso de producción se ajusta a los procedimientos estándar para asegurar calidad del producto óptima.
Q4: ¿Cómo proporcionar el servicio post-venta?
A4: Proporcionamos el servicio post-venta técnico en línea profesional. Podemos proveer de usted la dirección unívoca vía el vídeo, el teléfono, el etc.
Q5: ¿Cuál es la forma de pago?
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Q6: ¿Cómo enviar?
A6: Elija el mejor método de envío para usted consiguiendo citas de nuestros muchos portadores cooperativos, y también de la nave según sus requisitos.