Brucelosis ELISA Test Kit veterinaria para el perro bovino del cerdo de las ovejas de la cabra

Perro veterinario del cerdo de las ovejas de la cabra de ELISA Test Kit For Bovine de la brucelosis

 

Anticuerpo ELISA Kit de la brucelosis para el cerdo y el perro bovinos 96Wells/Kit de las ovejas de la cabra

 

1. Introducción

El equipo del anticuerpo ELISA de la brucelosis se utiliza para probar el anticuerpo de la brucelosis en el suero de los bóvidos, de la cabra, de las ovejas, del cerdo y del perro etc.
Este equipo utilizar el método competitivo de ELISA, antígeno de la brucelosis se cubre primero en tiras micro-bien de la enzima. Al probar, añada la muestra diluida del suero, después de la incubación, si hay anticuerpo específico de la brucelosis, él combinará con el antígeno cubierto primero, desechar el anticuerpo sin combinar y otros componentes con el lavado; entonces añada el anticuerpo monoclonal etiquetado enzima del virus de la anti-brucelosis, anticuerpo en muestra para bloquear la combinación de anticuerpo monoclonal y de antígeno cubierto primero; deseche la conjugación sin combinar de la enzima con el lavado; Añada el substrato de TMB en micro-pozos, la señal azul por catálisis de la enzima está en la proporción inversa de contenido del anticuerpo en la muestra, lector del uso ELISA en el wavelenth 450nm de medir la absorción un valor en pozos de la reacción después de añadir la solución de la parada para parar la reacción.

2. Reactivo y contenido

 

Código	Artículo	Espec.	Código	Artículo	Espec.
1	El Brucelosis-AG cubrió las placas 96wells	placas del 1/2	7	Pare la solución	15 ml
2	Conjugación de la enzima	10/20 ml	8	Control negativo	UL 200
3	10X concentró el almacenador intermediario que se lavaba	100 ml	9	Control positivo	UL 60
4	Substrato	11/22 ml	10	Hoja adhesiva	2/4 pedazo
5	Diluyente de la muestra	100 ml	11	Hoja de instrucción	1 pedazo
6	Placa del dilución del suero	pedazos del 1/2

 

3. El material requerido no proporcionó

1) Micropipeta: 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) extremidades disponibles de la pipeta.
3) graduado: 500ml.
4) lector de Microplate: 96 pozos.
5) agua destilada o agua desionizada.
6) lavadora de Microplate

4. Preparación de la muestra

Tome la sangre entera animal, consiguen el suero usando método regular, el suero si brillante y ninguna hemólisis.

5. Preparación del almacenador intermediario que se lava

La vuelta 10X concentró el almacenador intermediario que se lavaba en temperatura ambiente antes de usar, si hay cristales de la sal, sacude para hacerlo disuelto, entonces diluído él en 10 veces con agua destilada o agua desionizada. El almacenador intermediario que se lava diluido puede almacenar en 4℃for cerca de 1 semana.

 

 

6. Notas

 

1) Vuelva todos los reactivo a la temperatura ambiente antes de usar, sacuda mucho antes uso, y tienda en el uso posterior 2-8°C.
2) no mezcla los reactivo de diversos equipos y de lotes para evitar que los reactivo sean contaminados durante uso.
3) la solución del substrato y de la parada puede ser irritante a la piel y los ojos, utilizan por favor con cautela.
4) no expone el substrato a la luz fuerte y no evita el contacto con oxidante.
5) las placas plateadas de la brucella se deben sellar contra la humedad. Vuelva las placas inusitadas de MicroWell para secar bolsos de la hoja y para sellarlos en 2-8 °C.
6) toda la basura se debe manejar mucho antes la disposición para evitar la contaminación.
7) estrictamente seguir las instrucciones de funcionamiento para los mejores resultados. El medir con una pipeta, la sincronización y la limpieza deben ser exactos en el proceso.
8) el Brucelosis-AG cubrió las placas está disponible, no reutiliza.

7. Método de prueba

1) En la placa del dilución del suero, diluya el suero, el control negativo y el control positivo por 1:40 (por ejemplo: de la muestra 195ul + muestra del suero 5ul), y mezcla dilución bien;
2) toma a Brucelosis-AG la placa revestida (abierta y medida la cantidad requerida según la muestra), añade el suero diluido a los pozos de la prueba, 20ul/well; al mismo tiempo, el sistema 1 bien para el control positivo y 2 pozos para el control negativo, respectivamente en sus pozos Add diluyeron el control negativo y el control positivo diluido, 20ul/well;
3) añade la conjugación de la enzima, 80ul/well, sacude suavemente, la cubre con auto-adhesivo, e incuba en 37°C por 60 minutos;
4) abierto la hoja auta-adhesivo, vierte el líquido en el pozo, añade el almacenador intermediario diluido a cada pozo, 250ul/well del lavado, vierte el líquido, repite los pasos antedichos 4-6 veces, y finalmente utiliza el papel absorbente para mover de un tirón la tapa para secarse;
5) añade el substrato, 100ul/well, se mezcla bien, cubierta con auto-adhesivo, e incuba en 37°C por 15 minutos en la oscuridad;
6) añade la solución de la parada, 50ul/well para parar la reacción, y mide el resultado en 10 minutos.

 

8. Juicio de los resultados

 

Los pozos del control en blanco se fijan a cero y el valor del OD en 450nm se lee (630nm es la referencia).
Para que la detección trabaje:
Valor negativo (N)>0.5 del OD del control, mientras que valor positivo (p) que bloquea el rate>80%
Método del cálculo:
Pi (tarifa de bloqueo) = {1 (valor del OD de la muestra/valor medio del OD del control negativo)} x 100%
Interpretación de resultados
Pi (tarifa) de la obstrucción el > 70%: positivo
≤ el 70% del pi (tarifa de bloqueo): negativa

9. Almacenamiento y expirar fecha

Tienda en 2~8℃ en oscuridad, ningún congelado, fecha de vencimiento: 12 meses.

 

Manifestación clínica

Las manifestaciones clínicas de esta enfermedad son variables. Para los pacientes individuales, sus manifestaciones clínicas pueden ser simples, solamente mostrando absceso local, o muy complejo, mostrando órganos múltiples y los sistemas implicados al mismo tiempo. La brucelosis del tipo de las ovejas y del tipo del cerdo es sobre todo seria, mientras que los síntomas del tipo bovino son suaves, y algunos casos pueden no tener fiebre. La brucelosis de las ovejas es la enfermedad más común de China. El curso natural de pacientes no tratados es 3-6 meses (4 meses medios), pero puede ser tan corto como 1 mes o mientras varios años. El curso de la enfermedad puede generalmente ser agudo y crónico, y la fase aguda de tipo bovino no es a menudo obvia. El período de incubación es 7 a 60 días, generalmente 2 a 3 semanas, y algunos pacientes desarrollan enfermedad varios meses o más después de la infección. La mayor parte de las personas infectadas en el laboratorio vienen encendido en el plazo de 10 a 50 días.

Enfermedades infecciosas subagudas y agudas

Los cerca de 10%~30% de los pacientes tienen inicio súbito. Algunos pacientes tienen síntomas prodrómicos durante varios días, por ejemplo la debilidad, el insomnio, la fiebre baja, la anorexia, la inflamación superior de las vías respiratorias, el etc. Las manifestaciones clínicas principales en la fase aguda son fiebre, hiperhidrosis, cansancio, artritis, orquitis, etc.

(1) el tipo más común de calor es el tipo de la relajación. Aunque el tipo ondulado explique solamente el 5% al 20%, es la mayoría de la característica. Su fiebre tiene una proliferación de 2 a 3 semanas, seguida por 3 a 5 días a 2 semanas de ningún período del calor, y entonces las subidas del calor otra vez, así que el ciclo fluctúa y asume el tipo ondulado; La mayoría de los pacientes tienen solamente 2-3 ondas, y de vez en cuando más de 10. Otros tipos del calor incluyen el tipo irregular y la fiebre baja continua.

(2) la hiperhidrosis es el síntoma prominente de esta enfermedad, que es más prominente que otras enfermedades calientes. A menudo en el de última hora y la madrugada, el calor cae y suda repentinamente profusamente. La mayoría de los pacientes sienten débiles y débiles.

(3) el dolor común hace a menudo que los pacientes gimen y que sienten dolor insoportable. Puede implicar una o más juntas, principalmente sacroiliacas, la cadera, la rodilla, el hombro, la muñeca, el codo y otras juntas grandes. En etapa aguda, puede ser migratorio. El dolor es cónico, y las analgesias generales son ineficaces. Algunos pacientes tienen rojez y la hinchazón común, y supuración en el lado. La hinchazón local tal como bursitis, la tenosinovitis y la periartritis son también comunes. El dolor muscular es más común en ambos muslos y nalgas, que pueden causar dolor espástico.

(4) Testitis es también uno de los síntomas característicos de la brucelosis. Es causado por la implicación del testículo y del epidídimo. Es sobre todo unilateral y puede ser tan grande como un huevo de ganso con dulzura obvia.

(5) los síntomas secundarios incluyen dolor de cabeza, la neuralgia, la hepatosplenomegalia, la linfadenopatía, el etc. La erupción es relativamente rara.

 

 

 

 

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