Nitrofurano AMOZ ELISA Food Safety Rapid Test Kit For Milk Sensitivity 0.03ppb 96Wells/Kit

Nitrofurano AMOZ ELISA Food Safety Test Kit para la sensibilidad 0.03ppb 96Wells/Kit de la leche

 

1. Principio del nitrofurano AMOZ ELISA Food Safety Test Kit

 

Este equipo de la detección se basa en un immunoensayo competitivo de la enzima para la detección de AMOZ en muestras. Los antígenos conjugados se cubren primero en tiras del microwell. El AMOZ en la muestra compite con el antígeno conjugado cubierto primero en la tira del microwell para el anticuerpo anti-AMOZ. Después de que se añada la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añade para manchar. El valor de la densidad óptica (OD) de una muestra se correlaciona negativamente con el AMOZ en él. Este valor se compara a una curva estándar y la concentración de AMOZ se obtiene posteriormente.

 

2. Especificaciones técnicas

 

Sensibilidad: 0.03ppb

Temperatura de la incubación: 25℃

Tiempo de la incubación: 30min~15min

Tejido del límite de detección, huevo, miel: 0.1ppb

Tarifa del reacción cruzado

AMOZ 100%

AHD < 0="">

AOZ < 0="">

SEM < 0="">

Tarifa de recuperación

± el 25% del tejido 80

± el 25% de la miel 75

± el 25% del huevo 95

 

3. Componentes del nitrofurano AMOZ ELISA Food Safety Test Kit

 

1	Tiras micro-bien	12 tiras con 8 desprendibles pozos por cada uno
2	solución estándar 6× (1 ml cada uno)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	Conjugación de la enzima	7ml	casquillo rojo
4	Solución de funcionamiento del anticuerpo	7ml	casquillo azul
5	Substrato A	7ml	casquillo blanco
6	SubstrateB	7ml	casquillo negro
7	Pare la solución	7ml	casquillo amarillo
8	20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba	40ml	casquillo blanco
9	2× concentró la redisolución de la solución	50ml	casquillo transparente
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)

 

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

 

1) Equipo: lector del microplate, impresora, homogeneizador, secador del nitrógeno, vortexer, centrifugadora, tubo de medición, balanza (0.01g recíproco), incubadora, baño de agua;

2) Micropipeta: monocanal 20-200µL, 100-1000µL, 30-300µl de varios canales;

3) Reactivo: NaOH, acetato de etilo, n-hexano, ácido clorhídrico (cerca de 36,5%), K2HPO4 3H2O.

 

5. Tratamiento previo de la muestra

 

dé instrucciones

Los puntos siguientes se deben dirigir antes de cualquier clase de tratamiento previo de la muestra:

1) El experimento puede utilizar solamente extremidades disponibles, y las extremidades deben ser substituidas al aspirar diversos reactivo;

2) Antes del experimento, el equipo experimental se debe limpiar y re-limpiar en caso de necesidad para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:

1) 0,1 M K2HPO4: Disuelva g 11,4 de K2HPO4·3H2O en agua desionizada a 500 ml.

2) 1 M HCl: Disuelva 8,6 ml del ácido clorhídrico (cerca de 36,5%) en agua desionizada a 100 ml.

3) NaOH de 1 M: Disuelva 4 g de NaOH en agua desionizada a 100 ml.

4) 2× diluído concentró la redisolución de la solución con agua desionizada en el 1:1 (1 ml concentrado redisolviendo la solución + 1 ml de agua desionizada) para la redisolución de la muestra.

 

5,1 preparación de las muestras

) un tejido, huevo

1) Pese 1± 0.05g de la muestra homogeneizada, añada 4mL del agua destilada, 0.5mL 1 M HCI y 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) a cada tubo, sacuden correctamente para 2min;.

2) Incube at37℃ durante la noche (horas approx16) o incube at56℃ por el baño de agua (2 horas).

3) Añada 5mL los 0.1M K2HPO4, NaOH y 6mL el acetato de etilo a cada tubo, sacudida de 0.4mL el 1M para 30s.

4) Centrifugadora en 4000r/min antedicho en la temperatura ambiente (℃ 20-25) para 10min (si hay emulsificación o la capa del acetato de etilo no está bastante para 3ml, no incuba la muestra en el baño de agua de 80 ℃ para 10min y la centrifugadora en varias ocasiones; o aumente la velocidad y prolongue la época de la centrifugadora).

5) Transferencia 3mL de la capa del acetato de etilo en un nuevo tubo centrífugo y evaporarse al estado seco por el nitrógeno o el aire en 50℃.

6) Disuelva los residuos secos en el n-hexano 2mL, añada 1mL de la solución de redisolución diluida, mezcla correctamente por 30 segundos, centrifugadora en sobre 4000 r/min en la temperatura ambiente (℃ 20-25) para el minuto 10; Quite la fase del n-hexano de la para arriba-capa (si hay emulsificación, después de quitar fase del n-hexano de la para arriba-capa, incuba la muestra en el baño de agua de 70 ℃ para 10-20min, la centrifuga en varias ocasiones).

7) Tome a 50 el µL del más bajo para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 2

b) Miel

1) Pese 2± 0.05g de la muestra homogeneizada (miel), añada 4mL del agua destilada, 0.5mL 1 M HCI y 100 el µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) a cada tubo, sacude correctamente para 2min;.

2) Incube at37℃ durante la noche (horas approx16) o incube at56℃ por el baño de agua (2 horas).

3) Añada 5mL los 0.1M K2HPO4, NaOH y 6mL el acetato de etilo a cada tubo, sacudida de 0.4mL el 1M para 30s.

4) Centrifugadora en 4000r/min antedicho en la temperatura ambiente (20-25℃) para 10min (si hay emulsificación o la capa del acetato de etilo no está bastante para 3ml, no incuba la muestra en el baño de agua de 80 ℃ para 10min y la centrifugadora en varias ocasiones; o aumente la velocidad y prolongue la época de la centrifugadora).

5) Transferencia 3mL de la capa del acetato de etilo en un nuevo tubo centrífugo y evaporarse al estado seco por el nitrógeno o el aire en el ℃ 50.

6) Disuelva los residuos secos en el n-hexano 2mL, añada 1mL de la solución de redisolución diluida, mezcla correctamente por 30 segundos, centrifugadora en sobre 4000r/min en la temperatura ambiente (℃ 20-25) para el minuto 10; Quite la fase del n-hexano de la para arriba-capa (si hay emulsificación, después de quitar fase del n-hexano de la para arriba-capa, incuba la muestra en el baño de agua de 70 ℃ para 10-20min, la centrifuga en varias ocasiones).

7) Tome a 50 el µL del más bajo para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 1

 

6. Procedimientos de ELISA

 

6,1 instrucciones

1) Traiga todos los reactivo y tiras micro-bien a la temperatura ambiente (℃ 20-25) antes de usar;

2) Vuelva todos los reactivo al ℃ 2-8 inmediatamente después del uso;

3) La reproductibilidad del análisis de ELISA, depende en gran parte de la consistencia del lavado de la placa. La operación correcta del lavado de la placa es el punto clave en ELISA los procedimientos;

4) Para la incubación en las temperaturas constantes, todas las muestras y reactivo deben evitar la exposición luminosa, y cada microplate se debe sellar por la membrana de la cubierta.

6,2 procedimientos de la operación

1) Traiga el equipo de la prueba al minuto 30 de la temperatura ambiente (℃ 20-25) por lo menos, observe que cada reactivo se debe sacudir para mezclarse uniformemente antes de usar, ponga las tiras micro-bien requeridas en marcos de la placa. Reselló el microplate inusitado, tienda en el ℃ 2-8, no congelado.

2) Preparación de la solución: 40mL diluído del almacenador intermediario que se lava concentrado 20 × con agua desionizada en el 1:19 (almacenador intermediario que se lava concentrado × de 1 parte 20 + 19 porciones de agua desionizada). O prepárese según las necesidades.

3) Enumeración: número los micro-pozos según muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar se deben realizar dos veces, registran sus posiciones.

4) Añada 50µL de la muestra o de la solución estándar en pozos duplicados separados; añada la conjugación entonces 50µL de la solución de funcionamiento del anticuerpo en cada pozo, mezcla de la enzima 50ul suavemente sacudiendo la placa manualmente. Selle el microplate con la membrana de la cubierta, andincubate en 25 el ℃ for30min.

5) Vierta el líquido fuera del microwell, aleta para secarse en el papel absorbente, añada 250 µL/well del almacenador intermediario que se lava para lavar el microplate por 15-30s, después saque y agite para secarse con el papel absorbente, repita 4-5 veces. (Si hay las burbujas después de agitar, las cortó con las extremidades limpias).

6) Coloración: añada el µL 50 el µL del substrato A y entonces 50 del substrato B en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, después incube en el ℃ 25 para el minuto 15 en la oscuridad para la coloración.

7) Determinación: añada 50µL del paran la solución en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente. Fije la longitud de onda del lector del microplate en 450nm para determinar el valor del OD de cada pozo. (Recomiende leer el valor del OD en la dual-longitud de onda 450/630nm en el plazo de 5 minutos).

 

7. Juicio del resultado

 

Hay dos métodos para juzgar los resultados: primer es el juicio áspero, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa. Nota que el valor del OD de la muestra tiene una correlación negativa con la concentración de AMOZ.

7,1 determinación cualitativa

La gama de concentración (ng/mL) de AMOZ se puede obtener de comparar el valor medio del OD de la muestra con el de la solución estándar. Si se asume que el valor del OD de la muestraⅠ es 0,3, y el del Ⅱ de la muestra es 1,0, el valor del OD de soluciones estándar es: 2,243 para 0ppb, 1,816 para 0.03ppb, 1,415 para 0.09ppb, 0,74 para 0.27ppb, 0,313 para 0.81ppb, 0,155 para 2.43ppb, la gama de concentración del Ⅰ de la muestra es por consiguiente 0,81 a 2.43ppb, y el del Ⅱ de la muestra es 0,09 a 0.27ppb.

7,2 determinación cuantitativa

Los valores medios de los valores de la absorción se obtienen para el valor medio del OD (b) de la muestra y de la solución estándar divididas por el valor del OD (B0) de la primera solución estándar (0 estándares) y multiplicadas posteriormente antes de 100%, es decir,

Porcentaje del valor de la absorción =	B	el ×100%
	B0

Valor del OD de la media de B-the de la muestra o de la solución estándar

Valor del OD de la media de B0-the de las 0 soluciones estándar de ng/mL

Dibuje la curva estándar con los porcentajes de la absorción de la solución estándar y los valores del semilogarithm de la solución estándar de AMOZ (ng/mL) como la y y X-AXIS, respectivamente. Lea la concentración correspondiente de la muestra de la curva estándar incorporando su porcentaje de la absorción en la curva estándar. El valor resultante es multiplicado posteriormente por el doblez correspondiente del dilución, finalmente obteniendo la concentración de AMOZ en la muestra.

 

8. Precauciones

 

1) Si la temperatura ambiente es más baja que 25℃ o la temperatura el reactivo y la muestra no vuelven a la temperatura ambiente (20-25℃), el valor estándar del OD caerá.

2) Durante el proceso que se lava, la sequedad del microplate será acompañada por la ausencia de linealidad de la curva estándar, y la reproductibilidad no es ideal; por lo tanto, proceda al paso siguiente inmediatamente después del lavado.

3) Mézclese bien, si no la reproductibilidad será pobre.

4) La solución de la parada es solución ácida sulfúrica de 2 M, evita el contacto de piel.

5) No utilice el equipo más allá de la vida útil. El uso de reactivo diluidos o adulterados del equipo puede dar lugar a cambios en valores del OD de la sensibilidad y de la detección. No substituya los reactivo en diversos lotes de equipos.

6) Reselle los microplates inusitados en bolsos ziplock. Las soluciones estándar y los acopladores descoloridos son sensibles a la luz y no se pueden exponer directamente para encenderse.

7) Deseche cualquier solución que colorea cuyo color indique que la solución ha degradado. Un valor de la detección de menos de 0,5 para la solución estándar 1 (0 ppb) indica la degradación.

8) La temperatura óptima de la reacción es 25℃, y la sensibilidad de la detección y el valor del OD cambiarán si la temperatura es demasiado alta o demasiado baja.

 

9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento

 

Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.

Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.

Nota: Si el envasado al vacío del microplate tiene salida, es todavía válido utilizar, no afecta al resultado de la prueba, sea relajarse para utilizar.

 

 

Q1: ¿Cuándo será enviado?
A1: Enviaremos las mercancías para usted cuanto antes en el plazo de 7 días laborables después de recibir el pago. (En caso de factores externos tales como la epidemia, la entrega puede ser retrasada)

 

Q2: ¿Apoya OEM/ODM?
A2: Puede ser apoyado, pero la cantidad específica necesita ser más de 100.000 pedazos, que es conveniente para los productos modificados para requisitos particulares.

 

Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Nacionalmente hemos certificado ISO9001 e ISO13485. Nuestro proceso de producción se ajusta a los procedimientos estándar para asegurar calidad del producto óptima.

 

Q4: ¿Cómo proporcionar el servicio post-venta?
A4: Proporcionamos el servicio post-venta técnico en línea profesional. Podemos proveer de usted la dirección unívoca vía el vídeo, el teléfono, el etc.

 

Q5: ¿Cuál es la forma de pago?
A5: Recibimos el pago por T/T.

 

Q6: ¿Cómo enviar?
A6: Elija el mejor método de envío para usted consiguiendo citas de nuestros muchos portadores cooperativos, y también de la nave según sus requisitos.