Nitrofurano SEM ELISA Food Safety Test Kit para la sensibilidad 0.02ppb 96Wells/Kit de la leche

Nitrofurano SEM ELISA Food Safety Test Kit para la sensibilidad 0.02ppb 96Wells/Kit de la leche

 

1. Principio de SEM ELISA Food Safety Test Kit del nitrofurano

 

Este equipo de la prueba se basa en el immunoensayo competitivo de la enzima para la detección de nitrofurano (SEM) en la muestra. Los antígenos de acoplamiento se cubren primero en las rayas micro-bien. El nitrofurano (SEM) en la muestra y los antígenos de acoplamiento cubiertos primero en las rayas micro-bien compiten para los anticuerpos de anti-SEM. Después de que la adición de la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añada para la coloración. El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con SEM en él. Este valor se compara a la curva estándar y la concentración de SEM se obtiene posteriormente.

 

2. Especificaciones técnicas

 

Sensibilidad: 0.02ppb

Temperatura de la incubación: 25℃

Tiempo de la incubación: 30min~15min

Tejido del límite de detección, huevo, miel: 0.1ppb

Tarifa del reacción cruzado

SEM 100%

AMOZ < 0="">

AOZ < 0="">

AHD < 0="">

Tarifa de recuperación

Tejido el 75±25%

Miel el 70±20%

Huevo el 95±25%

 

3. Componentes de SEM ELISA Food Safety Test Kit del nitrofurano

 

1	Tiras micro-bien	12 tiras con 8 desprendibles pozos por cada uno
2	solución estándar 6× (1 ml cada uno)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Conjugación de la enzima	7ml	casquillo rojo
4	Solución de funcionamiento del anticuerpo	7ml	casquillo azul
5	Substrato A	7ml	casquillo blanco
6	SubstrateB	7ml	casquillo negro
7	Pare la solución	7ml	casquillo amarillo
8	20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba	40ml	casquillo blanco
9	2× concentró la redisolución de la solución	50ml	casquillo transparente
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	10ml	casquillo negro

 

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

 

1) equipos: el lector del microplate, impresora, homogeneizador, dispositivo de la nitrógeno-sequedad, vórtice, centrifugadora, midiendo mide con una pipeta, la balanza (una sensibilidad recíproca de 0,01 g), incubadora, baño de agua;

2) Micropipettors: 20-200µL monocanal, 100-1000µL, y 30~300µl de varios canales;

3) Reactivo: NaOH, acetato de etilo, n-hexano, HCI (36,5% aproximados), K2HPO4·3H2O.

 

5. Tratamiento previo de la muestra

 

Instrucciones

Los puntos siguientes se deben ocupar antes del tratamiento previo de la clase de muestra:

1) Solamente las extremidades disponibles se pueden utilizar para los experimentos y las extremidades deben ser cambiadas cuando están utilizadas para absorber diversos reactivo;

2) Antes del experimento, cada equipo experimental debe ser limpio y se debe re-limpiar en caso de necesidad, para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:

1) 0,1 M K2HPO4: disuelva g 11,4 K2HPO4·3H2O en agua desionizada a 500mL.

2) 1 M HCl: disuelva 8.6mL HCI (36,5% aproximados) en agua desionizada a 100mL.

3) NaOH de 1 M: disuelva NaOH 4g en agua desionizada a 100mL.

4) el 2×concentrated que redisuelve la solución se diluye con agua desionizada en el 1:1 (1mL concentró la redisolución de la solución + del agua desionizada 1mL), usado para la redisolución de la muestra.

 

5,1 preparación de las muestras

a) Tejido, huevo

1) Pese 1± 0.05g de la muestra homogeneizada, añada 4mL del agua destilada, 0.5mL 1 M HCI y 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) a cada tubo, sacuden correctamente para 2min;.

2) Incube el ℃ at37 durante la noche (horas approx16) o incube at56℃ por el baño de agua (2 horas).

3) Añada 5mL los 0.1M K2HPO4, NaOH y 6mL el acetato de etilo a cada tubo, sacudida de 0.4mL el 1M para 30s.

4) Centrifugadora en 4000r/min antedicho en la temperatura ambiente (℃ 20-25) para 10min (si hay emulsificación o la capa del acetato de etilo no está bastante para 3ml, no incuba la muestra en el baño de agua 80℃ para 10min y la centrifugadora en varias ocasiones; o aumente la velocidad y prolongue la época de la centrifugadora).

5) Transferencia 3mL de la capa del acetato de etilo en un nuevo tubo centrífugo y evaporarse al estado seco por el nitrógeno o el aire en 50℃.

6) Disuelva los residuos secos en el n-hexano 2mL, añada 1mL de la solución de redisolución diluida, mezcla correctamente por 30 segundos, centrifugadora en sobre 4000 r/min en la temperatura ambiente (℃ 20-25) para el minuto 10; Quite la fase del n-hexano de la para arriba-capa (si hay emulsificación, después de quitar fase del n-hexano de la para arriba-capa, incuba la muestra en el baño de agua 70℃ para 10-20min, la centrifuga en varias ocasiones).

7) Tome a 50 el µL del más bajo para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 2

b) Miel

1) Pese 2± 0.05g de la muestra homogeneizada (miel), añada 4mL del agua destilada, 0.5mL 1 M HCI y 100 el µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) a cada tubo, sacude correctamente para 2min;.

2) Incube el ℃ at37 durante la noche (horas approx16) o incube at56℃ por el baño de agua (2 horas).

3) Añada 5mL los 0.1M K2HPO4, NaOH y 6mL el acetato de etilo a cada tubo, sacudida de 0.4mL el 1M para 30s.

4) Centrifugadora en 4000r/min antedicho en la temperatura ambiente (20-25℃) para 10min (si hay emulsificación o la capa del acetato de etilo no está bastante para 3ml, no incuba la muestra en el baño de agua 80℃ para 10min y la centrifugadora en varias ocasiones; o aumente la velocidad y prolongue la época de la centrifugadora).

5) Transferencia 3mL de la capa del acetato de etilo en un nuevo tubo centrífugo y evaporarse al estado seco por el nitrógeno o el aire en el ℃ 50.

6) Disuelva los residuos secos en el n-hexano 2mL, añada 1mL de la solución de redisolución diluida, mezcla correctamente por 30 segundos, centrifugadora en sobre 4000r/min en la temperatura ambiente (℃ 20-25) para el minuto 10; Quite la fase del n-hexano de la para arriba-capa (si hay emulsificación, después de quitar fase del n-hexano de la para arriba-capa, incuba la muestra en el baño de agua 70℃ para 10-20min, la centrifuga en varias ocasiones).

7) Tome a 50 el µL del más bajo para el análisis.

Doblez del dilución de la muestra: 1

 

6. Procedimientos de ELISA

 

6,1 instrucciones

1) Traiga todos los reactivo y tiras micro-bien a la temperatura ambiente (℃ 20-25) antes de usar;

2) Vuelva todos los reactivo al ℃ 2-8 inmediatamente después del uso;

3) La reproductibilidad del análisis de ELISA, depende en gran parte de la consistencia del lavado de la placa. La operación correcta del lavado de la placa es el punto clave en ELISA los procedimientos;

4) Para la incubación en las temperaturas constantes, todas las muestras y reactivo deben evitar la exposición luminosa, y cada microplate se debe sellar por la membrana de la cubierta.

 

6,2 procedimientos de la operación

1) Ponga el equipo en la temperatura ambiente (20-25°C) por lo menos 30 minutos, observan que cada reactivo se debe sacudir y mezclar mucho antes uso, y ponen las tiras requeridas del microwell en el marco de la placa. Los microplates inusitados se deben resellar y almacenar en 2-8°C, no congelado.

2) Preparación de la solución: La toma 40 ml de 20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba y diluirlo con agua desionizada en el 1:19 (1 porción de 20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba + 19 porciones de agua desionizada). O prepárese según las necesidades.

3) Enumeración: Numere los microwells según las muestras y las soluciones estándar; cada muestra y solución estándar se deben hacer dos veces, y sus posiciones deben ser registradas.

4) Añada 50µL de la muestra o de la solución estándar para duplicar pozos; añada 50ul de la conjugación de la enzima a cada pozo, después añada 50µL de la solución de trabajo del anticuerpo, y sacuda la placa para mezclarse suavemente. Selle el microplate con una película de la cubierta e incube en 25°C para 30min.

5) Vierta el líquido en los microwells, palmadita seca en el papel absorbente, añada 250 μL/well del almacenador intermediario que se lava para lavar la placa del microwell por 15-30s, después saque y acaricie a seco con el papel absorbente, repita 4-5 veces. (Si hay burbujas de aire después de golpear ligeramente, las cortó con una extremidad limpia).

6) Desarrollo del color: Añada el µL 50 el µL del substrato A y 50 del substrato B a cada pozo. Sacuda la placa a mano para mezclarse suavemente y para incubar en 25°C para el minuto 15 en la oscuridad para el desarrollo del color.

7) Análisis: Añada el μL 50 de la solución de la parada a cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa a mano. Fije la longitud de onda del lector del microplate a 450 nanómetro para determinar el valor del OD de cada pozo. (Se recomienda para leer el valor del OD en la longitud de onda dual 450/630nm en el plazo de 5 minutos).

 

7. Juicio del resultado

 

Hay dos métodos para juzgar los resultados: primer es el juicio áspero, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa. Nota que el valor del OD de la muestra tiene una correlación negativa con el contenido de SEM.

7,1 determinación cualitativa

La gama de concentración (ng/mL) se puede obtener de comparar el valor medio del OD de la muestra con el de la solución estándar. Si se asume que el valor del OD de la muestraⅠ es 0,3, y el del Ⅱ de la muestra es 1.0ppb, el valor del OD de soluciones estándar es: 2,243 para 0ppb, 1,816 para 0.02ppb, 1,415 para 0.06ppb, 0,74 para 0.18ppb, 0,313 para 0.54ppb, 0,155 para 1.62ppb, la gama de concentración del Ⅰ de la muestra es por consiguiente 0,54 a 1.62ppb, y el del Ⅱ de la muestra es 0,06 a 0.18ppb.

7,2 determinación cuantitativa

Los valores medios de los valores de la absorción se obtienen para el valor medio del OD (b) de la muestra y de la solución estándar divididas por el valor del OD (B0) de la primera solución estándar (0 estándares) y multiplicadas posteriormente antes de 100%, es decir,

Porcentaje del valor de la absorción =	B	el ×100%
	B0

Valor del OD de la media de B-the (pozos dobles) de la muestra o de la solución estándar

Valor del OD de la media de B0-the de la solución estándar 0ng/mL

Dibuje la curva estándar con los porcentajes de la absorción de la solución estándar y los valores del semilogarithm de la solución estándar de SEM (ng/mL) como la y y X-AXIS, respectivamente. Lea la concentración correspondiente de la muestra de la curva estándar incorporando su porcentaje de la absorción en la curva estándar. El valor resultante es multiplicado posteriormente por el doblez correspondiente del dilución, finalmente obteniendo la concentración de SEM en la muestra.

 

8. Precauciones

 

1) Si la temperatura ambiente es más baja que 25℃ o la temperatura el reactivo y la muestra no vuelven a la temperatura ambiente (20-25℃), el valor estándar del OD caerá.

2) Durante el proceso que se lava, la sequedad del microplate será acompañada por la ausencia de linealidad de la curva estándar, y la reproductibilidad no es ideal; por lo tanto, proceda al paso siguiente inmediatamente después del lavado.

3) Mézclese bien, si no la reproductibilidad será pobre.

4) La solución de la parada es solución ácida sulfúrica de 2 M, evita el contacto de piel.

5) No utilice el equipo más allá de la vida útil. El uso de reactivo diluidos o adulterados del equipo puede dar lugar a cambios en valores del OD de la sensibilidad y de la detección. No substituya los reactivo en diversos lotes de equipos.

6) Reselle los microplates inusitados en bolsos ziplock. Las soluciones estándar y los acopladores descoloridos son sensibles a la luz y no se pueden exponer directamente para encenderse.

7) Deseche cualquier solución que colorea cuyo color indique que la solución ha degradado. Un valor de la detección de menos de 0,5 para la solución estándar 1 (0 ppb) indica la degradación.

8) La temperatura óptima de la reacción es 25℃, y la sensibilidad de la detección y el valor del OD cambiarán si la temperatura es demasiado alta o demasiado baja.

 

9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento

 

Almacenamiento: La tienda en 2-8°C, no congela.
Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de producción está en la caja.
Nota: Si los escapes de empaquetamiento al vacío del microplate, él se pueden todavía utilizar sin afectar a los resultados de la prueba, así que usted puede utilizarla con confianza.

 

Q1: ¿Cuándo será enviado?
A1: Enviaremos las mercancías para usted cuanto antes en el plazo de 7 días laborables después de recibir el pago. (En caso de factores externos tales como la epidemia, la entrega puede ser retrasada)

 

Q2: ¿Apoya OEM/ODM?
A2: Puede ser apoyado, pero la cantidad específica necesita ser más de 100.000 pedazos, que es conveniente para los productos modificados para requisitos particulares.

 

Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Nacionalmente hemos certificado ISO9001 e ISO13485. Nuestro proceso de producción se ajusta a los procedimientos estándar para asegurar calidad del producto óptima.

 

Q4: ¿Cómo proporcionar el servicio post-venta?
A4: Proporcionamos el servicio post-venta técnico en línea profesional. Podemos proveer de usted la dirección unívoca vía el vídeo, el teléfono, el etc.

 

Q5: ¿Cuál es la forma de pago?
A5: Recibimos el pago por T/T.

 

Q6: ¿Cómo enviar?
A6: Elija el mejor método de envío para usted consiguiendo citas de nuestros muchos portadores cooperativos, y también de la nave según sus requisitos.