Anticuerpo ELISA Test Kit One Step 192 Wells/equipos rápidos del virus de gripe de cerdos

Equipo de prueba de anticuerpos ELISA para el virus de la influenza porcina 96*2 pozos/equipo ISO9001

1. Principio

El virus de la influenza, denominado virus de la influenza, se puede dividir en tres tipos: A, B y C. Entre ellos, el virus de la influenza A se divide en muchos subtipos de acuerdo con los diferentes antígenos hemaglutinina H y neuraminidasa N.Actualmente se sabe que los virus de influenza A infectan a una variedad de animales, incluidos pájaros, humanos, cerdos, caballos, perros, ballenas, etc.
Este kit utiliza el método ELISA de bloqueo para detectar anticuerpos contra el virus de la influenza A en el suero de múltiples animales como cerdos, pájaros, perros, caballos, etc. combínelo con el antígeno recubierto previamente, deseche el anticuerpo no combinado y otros componentes con lavado;luego agregue el anticuerpo monoclonal anti-Influenza A marcado con enzima, el anticuerpo en la muestra bloquee la combinación de anticuerpo monoclonal y antígeno pre-recubierto;deseche el conjugado de enzima no combinado con lavado;Agregue sustrato TMB en micropocillos, la señal azul por catálisis enzimática está en proporción inversa al contenido de anticuerpos en la muestra, use un lector ELISA a una longitud de onda de 450 nm para medir el valor de absorbancia A en los pozos de reacción después de agregar la solución de parada para detener la reacción.

2. Reactivos y contenido

3. Material requerido no proporcionado

1) Micropipeta: 10ul-100ul, 100ul-1000ul.
2) Puntas de pipeta desechables.
3) Graduado: 500ml.
4) Lector de microplacas: 96 pozos con longitud de onda 450/630nm.
5) Agua destilada o agua desionizada.
6) Lavadora de botellas o lavadora de microplacas

4. Preparación de muestras

Tome sangre completa del animal, obtenga suero usando el método regular, el suero debe brillar y no hemólisis.

5. Preparación de tampón de lavado

Regrese el tampón de lavado concentrado 10X a temperatura ambiente antes de usarlo, si hay cristales de sal, agítelo para que se disuelva, luego dilúyalo 10 veces con agua destilada o agua desionizada.El tampón de lavado diluido se puede almacenar a 4 ℃ durante aproximadamente 1 semana.

6. Notas

1) Devuelva todos los reactivos a temperatura ambiente antes de usarlos, ponga los reactivos a temperatura ambiente durante al menos 1 hora.Agítelo uniformemente antes de usarlo y guárdelo nuevamente a 2-8 ℃ después de usarlo.
2) No mezcle reactivos de diferentes kits y diferentes números de lote, evite que los reactivos se contaminen al usarlos.
3) El sustrato y la solución de parada pueden irritar la piel y los ojos, tenga cuidado al usarlos.
4) No exponga el Substrato a la luz intensa y evite el contacto con el oxidante.
5) Las placas recubiertas de antígeno deben estar selladas y a prueba de humedad.Vuelva a colocar la placa Micro-Well sin usar en una bolsa de aluminio seca y séllela a 2-8 ℃.
6) Todos los desechos deben tratarse bien para evitar la contaminación antes de desecharlos.
7) El estricto cumplimiento de las instrucciones de funcionamiento puede obtener los mejores resultados.La operación de pipeteo, el tiempo y el lavado de todo el proceso deben ser precisos.
8) Las placas recubiertas de antígeno son desechables, no repita el uso.

7. Procedimiento de prueba

1) Tome la placa recubierta de antígeno (la placa se puede abrir y usar varias veces según la cantidad de muestra cada vez), para cada prueba, configure 1 pocillo para control positivo y 2 pocillos para control negativo, control positivo y control negativo no necesita diluir, tome 100ul directamente y agregue en su pozo;
2) Agregue diluyente de muestra a los pozos de reacción, 60 ul/pozo, luego agregue la muestra de suero a los pozos de reacción, 40 ul/pozo, sople y mezcle uniformemente (No mezcle las puntas de uso)
3) Cúbralo con papel adhesivo, incube a 37 ℃ durante 60 minutos;
4) Abra la lámina adhesiva, deseche el líquido del pocillo, agregue tampón de lavado diluido a cada pocillo, 250 ul/pocillo, luego deseche el líquido, repita el paso anterior 6 veces, por último tape para secar con el papel absorbente;
5) Agregar conjugado enzimático 100 ul/pozo, cubrirlo con lámina adhesiva, incubar a 37 ℃ durante 60 minutos;
6) Abra la lámina adhesiva, deseche el líquido del pozo, lavando por 6 veces como en el paso 4), recuerde por último tapar para secar con el papel absorbente;
7) Agregue el sustrato, 100 ul/pocillo, mézclelo uniformemente y luego cúbralo con papel adhesivo, incube a 37 ℃ en la oscuridad durante 10 minutos;
8) Agregue solución de parada 50 ul/pozo para detener la reacción, mida el resultado en 10 minutos.

8. Juicio de resultados

Lea el valor de OD con ELISA Reader a 450nm (630nm como referencia).
Para que el ensayo sea válido:
Control negativo (N) Valor de DO > 0,4;
Método de cálculo:
Valor de muestra OD/valor promedio de OD del control negativo = valor S/N
Interpretación de resultados
Valor S/N ≥ 0,4: Negativo;
Valor S/N < 0.4: Positivo.

9. Conservación y fecha de caducidad

Conservar a 2~8℃ en la oscuridad, sin congelar, fecha de caducidad: 12 meses.

Introducción al virus de la influenza porcina

El virus de la influenza porcina (Swine Influenza Virus) es un ortomixovirus que puede causar una influenza endémica en los cerdos.El 30 de abril de 2009, la Organización Mundial de la Salud cambió el nombre del nuevo virus mortal anteriormente conocido como gripe porcina H1N1 influenza A. La gripe porcina es una enfermedad infecciosa respiratoria altamente infecciosa de los cerdos.Se caracteriza por un inicio rápido, fiebre repentina y otros síntomas de resfriado.La recuperación es tan rápida como la ocurrencia.La influenza porcina es causada por un virus de la influenza, que pertenece al mismo género que el virus de la influenza que infecta a los seres humanos.El virus de la enfermedad tiene las características de coinfección de humanos y animales.La aparición de gripe porcina en piaras suele estar relacionada con la introducción de nuevas piaras en granjas porcinas.

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