Prueba porcina Kit Antibody ELISA Diagnostic 192 Wells/equipo GMP de la gripe de cerdos de PRV Pseudorabies GB

Kit de prueba ELISA de anticuerpos gB contra la pseudorrabia porcina 192 pocillos/kit GMP

 

1. Uso

El kit de prueba ELISA de anticuerpos contra la pseudorrabia porcina (PRV) GreenSpring® se utiliza para la detección de anticuerpos gB contra la pseudorrabia porcina en suero porcino;evaluación de las condiciones de inmunidad frente a la Pseudorrabia porcina en la explotación porcina e investigación de la epidemiología de la Pseudorrabia porcina.Si bien el resultado no puede distinguir el anticuerpo inmunitario y el anticuerpo infeccioso, para confirmar que se trata de un anticuerpo por vacuna o infección por virus salvaje es necesario combinar datos clínicos, estado inmunitario y otros métodos de diagnóstico.

 

2. Principio

El kit de prueba ELISA de anticuerpos gB contra la pseudorrabia porcina (PRV) GreenSpring® está hecho de la placa de microtitulación recubierta de antígeno (recubierta con el antígeno PRV) y otros reactivos.Aplica el principio ELISA de fase sólida a PRV-Ab en suero, luego agrega el conjugado de enzima para unirse específicamente con el complejo de antígeno recubierto + PRV-Ab + anticuerpo anti-pig-IgG marcado con enzima en la microplaca.Con el sustrato TMB generará una cantidad de color.La profundidad de color es relativa al contenido de PRV-Ab, cuando el valor de color es mayor que el valor de corte, los cerdos están bien vacunados o existen infectados naturales.

 

3. Los componentes del equipo

 

1	Microplaca recubierta de antígeno PRV-gB	96T X 2
2	Conjugado enzimático	22ml	tapa amarilla
3	Solución diluyente de muestra	50ml	tapa transparente
4	PRV-IgG Suero de control negativo	1,5 ml	tapa verde
5	PRV-IgG Suero de control positivo	1,5 ml	tapa roja
6	Sustrato	12mlX2	tapa naranja
7	Detener la solución	12ml	tapa azul
8	Tampón de lavado concentrado 20×	50ml	tapa blanca
9	Lámina adhesiva	6 piezas
10	Instrucción	1 pieza

 

4. Materiales necesarios pero no proporcionados

1) Lector de microplacas (longitud de onda doble: 450/630 nm).
2) Micropipeta precisa (monocanal 1-100ul, 0,5-10ul, multicanal 30-300ul)
3) Caja de temperatura constante o caja de baño de agua.
4) Oscilador.
5) Lavador de microplacas.
6) puntas desechables (10ul, 200ul)
7) agua desionizada

 

5. Requisito de muestra

1) Las muestras son suero porcino, que debe recogerse sin bacterias.El tiempo de almacenamiento debe ser inferior a 1 semana a 2-8 ℃, si es a largo plazo, debe mantenerse a -20 ℃.
2) Evitar el uso de muestras con hemólisis severa, precipitadas, contaminadas por bacterias o suspensión proteica.
3) El EDTA, la heparina sódica y otros anticoagulantes no afectarán los resultados.

 

6. Preparación

1) Lleve los reactivos ELISA a temperatura ambiente (20-25 ℃) durante 30 minutos para obtener los mejores resultados.
2) Muestra diluida: diluya la muestra con el diluyente de muestra 40 veces. (Habrá un cambio de color después de agregar la solución), la muestra diluida debe mezclarse uniformemente para obtener mejores resultados.
3) Preparación de la solución de lavado: Diluya el tampón de lavado concentrado 20x con agua desionizada 20 veces.

 

7. Procedimiento

1) Saque las placas recubiertas (se pueden separar) y registre la posición de la muestra en una hoja de trabajo.Configure 2 pozos para suero de control negativo, agregue suero de control negativo sin diluir, 2 pozos para suero de control positivo, agregue suero de control positivo sin diluir, 100 μL/pozo.Otros son pozos de muestra, agregue la muestra diluida, 100 μL cada uno (tanto la prueba de pozo simple como la de pozo doble están bien).
2) Mezclar suavemente, tapar e incubar a 37 ℃ durante 30 min.
3) Retire la lámina adhesiva.Vierta el líquido de los pocillos, agregue el tampón de lavado diluido en cada pocillo por completo, vierta directamente, sin necesidad de estar estático.Repetir 3 veces, por última vez secar con palmaditas sobre papel absorbente.
4) Agregue 100 μL de conjugado enzimático en cada pocillo.
5) Cubra la placa con una lámina adhesiva nueva. Incube a 37 ℃ durante 30 min.
6) Repita el paso 3 (lavado).
7) Agregue 100 ul de sustrato en cada pocillo, mezcle correctamente, incube durante 10 min a 37 ℃ en la oscuridad con una lámina adhesiva nueva.
8) Agregue 50 μL de solución de parada en cada pocillo, mezcle suavemente y determine el resultado.
9) Mida el valor de OD de cada pocillo con un fotómetro a una longitud de onda dual de 450 nm/630 nm.

 

8. Resultados

Para que el ensayo sea válido, el valor medio de la DO de los pocillos de control positivo debe ser superior o igual a 0,6, y el valor medio de la DO de los pocillos de control negativo es inferior a 0,1.De lo contrario, la prueba no es válida, necesita probar nuevamente.
El resultado se juzga por el valor S/P,
S/P=(Muestra OD450/630- NCx(—))/( PCx(—)- NCx(—)), NCx(—) significa el valor promedio de OD450/630 del control negativo, PCx(—) significa el valor promedio de OD450 del control positivo /630 valor
Si S/P≥0,2, es positivo;menos de 0,2, es negativo.

 

9. Interpretación del resultado

1. Hemólisis severa, la proteína de fibra en la separación del suero no es suficiente, contiene eritrocitos, un precipitado, una muestra con bacterias puede dar lugar a un falso positivo.
2. Pueden ocurrir resultados negativos en cerdos individuales después de las vacunas debido a diferencias individuales o duración inmune.
3. Resultados positivos para el diagnóstico serológico y la investigación epidemiológica de los cerdos para combinarlos con otros métodos y datos clínicos.

 

10. Rendimiento del producto

1. Especificidad: use este kit para detectar suero de referencia, la tasa de cumplimiento alcanza el 100%.
2. Sensibilidad: puede alcanzar un máximo de 1:5120.
3. Precisión: CV (%) no superior al 8%.
4. Estabilidad: almacenar a 2 ℃ ~ 8 ℃ durante 12 meses o almacenar a 37 ℃ durante 3 días, el resultado puede alcanzar los 3 estándares anteriores.

 

11. Precauciones y advertencias para los usuarios

1. Este kit de prueba es solo para uso en investigación.n.
2. No utilice reactivos vencidos, no mezcle reactivos de diferentes lotes.
3. Lea atentamente el Manual antes de su uso.
4. La basura del experimento debe tratarse con esterilización por vapor a alta presión a 121 ℃ durante 30 minutos, o tratarse con desinfectante de hipoclorito de sodio 5,0 g/l durante 30 minutos, luego desechar.
5. La placa MicroWell que se retira del ambiente refrigerado debe equilibrarse con la humedad para que se seque a temperatura ambiente y luego se pueda abrir.Vuelva a colocar la placa MicroWell sin usar en una bolsa de aluminio seca y séllela a 4 ℃.El reactivo líquido no utilizado debe cubrir las tapas, almacenar a 2-8 ℃ en la oscuridad con otros componentes del grupo.
6. Si el tampón de lavado concentrado 20x parece cristalizado, es normal, póngalo a 37 ℃ hasta que se disuelva.
7. Debe usar Micropipettor para agregar muestras y reactivos y, a menudo, probar su precisión.
8. Al agregar tampón de lavado, debe estar lleno pero sin desbordamiento, evite que aparezcan enzimas libres en la boca del pozo o contaminación cruzada entre pozos.
9. La solución de parada es corrosiva, use una gran cantidad de agua para lavarla inmediatamente cuando toque la piel o la ropa.

 

Especificaciones: 96 pozos × 2.
Caducidad: 12 meses.
Almacenamiento:Almacenar a 2~8℃, en la oscuridad.
Fecha de producción: en el embalaje exterior del kit de prueba.

 

 

Epidemiología del virus de la pseudorrabia porcina

El virus de la pseudorrabia está ampliamente distribuido en el mundo.La pseudorrabia ocurre naturalmente en cerdos, vacas, ovejas, perros y gatos.Además, una variedad de animales salvajes y carnívoros también son susceptibles.El visón y el hurón también pueden causar brotes de seudorrabia al alimentarlos con despojos de cerdo que contienen el virus de la seudorrabia.Entre los animales de experimentación, los conejos son los más sensibles y también pueden infectarse ratones, ratas y cobayos.Hay pocos informes sobre la infección humana con el virus de la pseudorrabia y ninguno de ellos se basa en el aislamiento del virus.
Los cerdos son el huésped de almacenamiento del virus de la pseudorrabia, y los cerdos enfermos, los cerdos infectados y los ratones infectados son fuentes importantes de infección de la enfermedad.Muchos estudiosos creen que la infección de otros animales está relacionada con el contacto con cerdos y ratones.
En las explotaciones porcinas, el virus de la pseudorrabia se transmite principalmente a los cerdos sanos mediante la eliminación de los cerdos infectados.Además, el personal y el equipo contaminados por el virus de la pseudorrabia juegan un papel importante en la transmisión.La transmisión aérea es la principal forma de propagación del virus de la pseudorrabia, pero no está claro hasta dónde puede propagarse.También se ha encontrado que el ganado que pasta alrededor de las granjas porcinas donde se presenta la pseudorrabia en las cercanías también puede enfermarse.En este caso, la transmisión aérea es la única forma posible.En los cerdos, el virus se transmite principalmente a través de las secreciones nasales.Además, la leche y el semen también son posibles vías de transmisión.
Después de infectarse con el virus de la pseudorrabia, todos los animales, excepto los cerdos, murieron.
La pseudorrabia ocurre estacionalmente, principalmente en las estaciones frías, pero también en otras estaciones.

 

 

 

 

 

 

P1: ¿Cuánto tiempo tardará en enviarse?
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P4: ¿Está garantizado el servicio posventa?
A4: Brindamos un servicio posventa técnico profesional en línea.Si el producto falla durante el experimento, podemos proporcionar
orientación personalizada a través de teléfono, video y otras formas.

 

P5: ¿Cuál es la cantidad mínima de pedido?
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Q6: ¿Cuál es el método de envío?
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