Phenylethanolamine un suero de ELISA Test Kit For Milk Egg Urine alimenta 96 Wells/el equipo

Phenylethanolamine un suero de la orina del huevo de ELISA Test Kit For Milk alimenta 96 Wells/el equipo

 

1. Principio

El equipo de la prueba se basa en el immunoensayo competitivo de la enzima para la detección de Phenylethanolamine A en la muestra. El antígeno conjugado se cubre primero en las rayas micro-bien. El Phenylethanolamine A en la muestra y los antígenos de acoplamiento cubiertos primero en las rayas micro-bien compiten para los anticuerpos antis de Phenylethanolamine A. Después de que la adición de la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añada para la coloración. El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con la concentración de Phenylethanolamine A en la muestra. El valor se compara a la curva estándar y la concentración de Phenylethanolamine A se obtiene posteriormente.

 

2. Especificaciones técnicas

Sensibilidad: 0,1 ppb
Temperatura de la incubadora: 25℃
Tiempo de la incubadora: 30min~15min

Límite de detección
Ppb del tejido 0,2
Alimente 0,5 ppb

Reacciones cruzados:
Phenylethanolamine A 100%
Tarifa <1> de recuperación <1> de Ractopamine <1> Salbutamol Clenbuterol
Tejido, alimentación el 85±25%

 

3. Componentes

 

1	Tiras micro-bien	12 tiras con 8 desprendibles pozos por cada uno
2	solución estándar 6× (1mL cada uno)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Conjugación de la enzima	7ml	casquillo rojo
4	Solución de funcionamiento del anticuerpo	7ml	casquillo azul
5	Substrato A	7ml	casquillo blanco
6	SubstrateB	7ml	casquillo negro
7	Pare la solución	7ml	casquillo amarillo
8	20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba	40ml	casquillo blanco
9	2× concentró la redisolución de la solución	50ml	casquillo transparente

 

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Equipos: el lector del microplate, impresora, homogeneizador, dispositivo de la nitrógeno-sequedad, oscilador, centrifugadora, midiendo mide con una pipeta, la balanza (una sensibilidad recíproca de 0,01 g), incubadora.
2) Micropipettors: µL 20-200 µL monocanal y 100-1000, y µL de varios canales 30-300;
3) reactivo: Acetato de etilo, n-hexano, ácido acético glacial

 

5. Tratamiento previo de la muestra

Instrucciones (los puntos siguientes se deben ocupar antes del tratamiento previo)
1) solamente las extremidades disponibles se pueden utilizar para los experimentos y las extremidades deben ser cambiadas cuando están utilizadas para absorber diversos reactivo;
2) antes del experimento, cada utensilio experimental debe ser limpio y se debe re-limpiar en caso de necesidad, para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:
1) muestra que extrae la solución: tome a 99ml el acetato de etilo, añada 1 ml de ácido acético glacial, y mézclelo bien.
2) muestra que redisuelve la solución: el 2×concentrated que redisuelve la solución se diluye con agua desionizada en el 1:1 (1mL concentró la redisolución de la solución + del agua desionizada 1mL), usado para la redisolución de la muestra.

Preparación de las muestras
5,1 alimentación
1. la muestra de la rutina, toma 1.0±0.05g en un tubo de centrífuga 50ml;
2. añada la muestra de 10 ml que extrae la solución, sacudida con el oscilador para el minuto 3;
3. centrifugadora en 4000 r/min en la temperatura ambiente para el minuto 10;
4. tome el sobrenadante, el soplo para secarse con nitrógeno o el aire de 2 ml en el ℃ 50-60;
5. añada 1 ml de n-hexano, después añada la muestra 1ml que redisuelve la solución, sacudida para 30s;
6. la centrifugadora en 4000 r/min en la temperatura ambiente para el minuto 10, quita la fase orgánica de la para arriba-capa.
7. tome la abajo-capa de 20 µL para el análisis.
Doblez del dilución de la muestra: 5
(Porque hay disturbio de la muestra, recommend2PPB como valor CORTADO muestra. )

5,2 tejido
muestra de tejido homogénea 1.Take 2.0±0.05g en un tubo de centrífuga 50ml;
2.Add muestra de 8 ml que extrae la solución, sacudida con el oscilador para el minuto 2;
3.Centrifuge en 4000 r/min en la temperatura ambiente para el minuto 10;
4.Take sobrenadante, soplo a secarse con nitrógeno o aire de 2 ml en 50-60℃;
5.Add 1 ml de n-hexano, después añaden la muestra 1ml que redisuelve la solución, sacudida para 30s;
6.Centrifuge en 4000 r/min en la temperatura ambiente para el minuto 10, quitan la fase orgánica de la para arriba-capa.
abajo-capa del µL 7.Take 20 para el análisis.
Doblez del dilución de la muestra: 2
(Porque hay disturbio de la muestra, recommend1PPB como valor CORTADO muestra. )

 

6. Procedimientos de ELISA

6.1Instructions
1. traiga todos los reactivo y tiras micro-bien a la temperatura ambiente (℃ 20-25) antes de usar.
2. vuelta todos los reactivo al ℃ 2-8 inmediatamente después del uso.
3. La reproductibilidad del análisis de ELISA, depende en gran parte de la consistencia del lavado de la placa. La operación correcta del lavado de la placa es los puntos claves en los procedimientos de ELISA.
4. Para la incubación en las temperaturas constantes, todas las muestras y reactivo deben evitar la exposición luminosa, y cada microplate se debe sellar por la membrana de la cubierta.

procedimientos 6.2Operation
1. traiga el equipo de la prueba a la temperatura ambiente (20-25 ℃) por lo menos 30 minuto, la nota que cada reactivo líquido se debe sacudir para mezclarse uniformemente antes de usar.
2. preparación de la solución: Diluya el almacenador intermediario concentrado 20× del lavado 40ml con agua desionizada en el 1:19 (almacenador intermediario concentrado 20× del lavado de 1 porción + 19 porciones de agua desionizada), o prepárese como cantidad necesaria.
3. ponga las tiras micro-bien requeridas en marcos de la placa. Reselló el microplate inusitado, almacenado en el ℃ 2-8, no congelado.
4. enumeración: número los micro-pozos según muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar se deben realizar dos veces; registre sus posiciones.
5. añada el µL 50 de la muestra o la solución estándar en pozos duplicados separados; añada el µL 50 de la conjugación de la enzima, después añada 50 el µL de la solución de trabajo del anticuerpo en cada pozo, sello el microplate con la membrana de la cubierta, andincubate en el ℃ 25 para 30 mínimos.
6. vierta líquido fuera del microwell, aleta para secarse en el papel absorbente; añada 250 µL/well del agua desionizada, lávese por 15-30 segundos, después saque y agite para secarse con el papel absorbente, repita 4-5 veces.
7. coloración: añada 50 el µL de la solución del substrato A, µL 50 de la solución de B en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, e incube en 25 el minuto del ℃ for15 en la oscuridad para la coloración.
8. determinación: añada 50 que el µL del para la solución en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente. Fije la longitud de onda del lector del microplate en 450 nanómetro para determinar el valor del OD de cada pozo. (Recomiende leer el valor del OD en la dual-longitud de onda 450/630 nanómetro en el plazo del minuto 5).

 

7. Juicio del resultado

Hay dos métodos para juzgar los resultados; primer es el juicio áspero, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa. Nota que el valor del OD de la muestra tiene una correlación negativa con el Phenylethanolamine A en la muestra.

7,1 determinación cualitativa
La gama de concentración (ng/mL) puede ser forma obtenida que compara el valor medio del OD de la muestra con la de la solución estándar. Si se asume que el valor del OD de la muestraⅠ es 0,3, y el del Ⅱ de la muestra es 1,0, el valor del OD de soluciones estándar es: 2,243 para 0ppb, 1,866 para 0.1ppb, 1,415 para 0.3ppb, 0,864 para 0.9ppb, 0,413 para 2.7ppb, 0,155 para 8.1ppb, la gama de concentración del Ⅰ de la muestra es por consiguiente 0,3 a 0.9ppb, y el del Ⅱ de la muestra es 2.7ppb a 8.1ppb.

7,2 determinación cuantitativa
Los valores medios de los valores de la absorción obtenidos para el valor medio del OD (b) de la muestra y de la solución estándar divididas por el valor del OD (B0) de la primera solución estándar (0 estándares) y multiplicadas posteriormente antes de 100%, de que son

 

Porcentaje del valor de la absorción =	B	el ×100%
	B0

 

Valor del OD de la media de B-the de la muestra o de la solución estándar
Valor del OD de la media de B0-the de las 0 soluciones estándar de ng/mL
Dibuje la curva estándar con los porcentajes de la absorción de las soluciones estándar y los valores del semilogarithm de las soluciones estándar de Phenylethanolamine A (ng/mL) como la y y X-AXIS, respectivamente. Lea la concentración correspondiente de la muestra de la curva estándar incorporando su porcentaje de la absorción en la curva estándar. El valor resultante es multiplicado posteriormente por el doblez correspondiente del dilución, finalmente obteniendo la concentración real de Phenylethanolamine A en la muestra.
Usando analizando el software profesional de este equipo será más conveniente para el análisis exacto y rápido de una gran cantidad de muestras. (Éntrenos en contacto con por favor para este software)

8. Precauciones

1. La temperatura ambiente debajo del ℃ 25 o la temperatura de los reactivo y de las muestras que no son vueltos a la temperatura ambiente (℃ 20-25) llevará a un valor estándar más bajo del OD.
2. la sequedad del microplate en el proceso que se lava será acompañada por las situaciones incluyendo las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable; Continúe tan al paso siguiente inmediatamente después del lavado.
3. la mezcla uniformemente, placa del lavado totalmente, la reproductibilidad del análisis de ELISA, depende en gran parte de la consistencia del lavado de la placa.
4. Pare la solución es la solución ácida sulfúrica de 2 M, evitan entrar en contacto con con la piel.
5. No utilice el equipo que excede su fecha de vencimiento. El uso de reactivo diluidos o adulterados de los equipos llevará a los cambios en la sensibilidad y los valores de detección del OD. No intercambie los reactivo de los equipos de diversos números de lote para utilizar.
6. ponga el microplate inusitado en un bolso del auto-lacre para resellarlo. La sustancia estándar y el color descolorido anteriores es sensibles a la luz, y no pueden ser expuestos así directamente a la luz.
7. deseche la solución de la coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución. El valor de detección de los 0 solutin del estándar de menos de 0,5 (A450 nanómetro< 0=""> 8. La temperatura óptima de la reacción es el ℃ 25, y las temperaturas demasiado altas o bajas darán lugar a los cambios en la sensibilidad de detección y valores del OD.

9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento

Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.
Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.
Nota: Si el envasado al vacío del microplate tiene salida, es todavía válido utilizar, no afecta al resultado de la prueba, sea relajarse para utilizar.

 

 

 

 

 

Q1: ¿Cuándo será enviado?
A1: Enviaremos las mercancías para usted cuanto antes en el plazo de 7 días laborables después de recibir el pago. (En caso de factores externos tales como la epidemia, la entrega puede ser retrasada)

 

Q2: ¿Apoya OEM/ODM?
A2: Puede ser apoyado, pero la cantidad específica necesita ser más de 100.000 pedazos, que es conveniente para los productos modificados para requisitos particulares.

 

Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Nacionalmente hemos certificado ISO9001 e ISO13485. Nuestro proceso de producción se ajusta a los procedimientos estándar para asegurar calidad del producto óptima.

 

Q4: ¿Cómo proporcionar el servicio post-venta?
A4: Proporcionamos el servicio post-venta técnico en línea profesional. Podemos proveer de usted la dirección unívoca vía el vídeo, el teléfono, el etc.

 

Q5: ¿Cuál es la forma de pago?
A5: Recibimos el pago por T/T.

 

Q6: ¿Cómo enviar?
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