Pato 96 Wells/Kit Sensitivity del cerdo del pollo de Olaquindox ELISA Diagnostic Method Test For 0,2 Ppb

Olaquindox ELISA Test Kit para el pato 96 Wells/Kit Sensitivity del cerdo del pollo 0,2 ppb

 

1. Principio

Este equipo de la prueba se basa en el immunoensayo competitivo de la enzima para el ofOlaquindox de la detección en la muestra. Los antígenos de acoplamiento se cubren primero en las rayas micro-bien. TheOlaquindox en la muestra y los antígenos de acoplamiento cubiertos primero en las rayas micro-bien compiten para el anticuerpo anti-Olaquindox. Después de que la adición de la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añada para la coloración. El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con el Olaquindox en él. Este valor se compara a la curva estándar y la concentración de Olaquindox se obtiene posteriormente.

2. Especificaciones técnicas

Sensibilidad: 0,2 ppb
Temperatura de la incubadora: 37℃
Tiempo de la incubadora: 30min~30min~15min

Límite de detección:
Cerdo, ppb del pollo 0,2
Ppb porcino del hígado 1
Alimentación 20ppb

Tarifa del reacción cruzado:
El Olaquindox100%
Carbadox<7>

Tarifa de recuperación:
El Tissue95%±25%
El Feed70%±20%

3. Componentes

 

1	Tiras micro-bien	12 tiras con 8 desprendibles pozos por cada uno
2	solución estándar 6× (1 ml cada uno)	0ppb	0.2ppb
		0.6ppb	1.8ppb
		5.4ppb	16.2ppb
3	Conjugación de la enzima	12ml	casquillo rojo
4	Solución de funcionamiento del anticuerpo	7ml	casquillo azul
5	Substrato A	7ml	casquillo blanco
6	SubstrateB	7ml	casquillo negro
7	Pare la solución	7ml	casquillo amarillo
8	20× concentró el almacenador intermediario que se lavaba	40ml	casquillo blanco
9	2× concentró la redisolución de la solución	50ml	casquillo transparente

 

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Equipos: el lector del microplate (450nm/630nm), homogeneizador, oscilador, centrifugadora, midiendo mide con una pipeta, dispositivo y balanza (una sensibilidad de la nitrógeno-sequedad recíproca de 0,01 g), incubadora.
2) Micropipettors: 20 monocanal a 200µL y 100 a 1000µL y a 30~300µl de varios canales;
3) reactivo: Acetonitrilo, n-hexano, Al2O3

5. Tratamiento previo de la muestra

Instrucciones
Los puntos siguientes se deben ocupar antes del tratamiento previo de la clase de muestra:
1) solamente las extremidades disponibles se pueden utilizar para los experimentos y las extremidades deben ser cambiadas cuando están utilizadas para absorber diversos reactivo;
2) antes del experimento, cada utensilio experimental se debe comprobar para ser limpio y se debe re-limpiar en caso de necesidad, para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la muestra
1) solución de Sampleredissolving: Dilute2× concentró la redisolución de la solución con agua desionizada en el 1:1

5.1Tissues (pollo, cerdo/hígado)
1. tome 2± 0.05g de la muestra homogeneizada en el tubo de centrífuga 50ml, add10mLAcetonitrile (sin el agua), sacuden correctamente for2min. Centrifugadora en above4000r/el minuto en la temperatura ambiente (20 - 25℃) para 10min.
2. sobrenadante, soplo a secarse con nitrógeno o aire de Take5mL en 56℃.
3. disuelva el residuesin seco 2mlN-hexane, add1mL de la solución de redisolución diluida, mixthoroughly para 30s, centrifugadora en above4000r/el minuto en la temperatura ambiente (20-25℃) for5min. Quite la fase del para arriba-layerN-hexano.
4. tome a 50 el µL para el análisis.
Doblez del dilución de la muestra: 1

5.2Feed
1. pese 1± 0,05 g homogeneizó la muestra en el tubo de centrífuga, añaden 2gAl2O3, después 5mlAcetonitrile, shakeviolently for3min, centrifugadora en above4000r/el minuto en 25℃ for5min;
2. Take50ulsupernatant, mezcla con 950ul diluyó la redisolución solutionevenly, toma el líquido de la para arriba-capa 50µL para el análisis.
Doblez del dilución de la muestra: 100

6. Procedimientos de ELISA

6,1 instrucciones
1) trae todos los reactivo y tiras micro-bien a la temperatura ambiente (20-25℃) antes de usar;
2) vuelta todos los reactivo a 2-8℃ inmediatamente después del uso;
3) la reproductibilidad del análisis de ELISA, depende en gran parte de la consistencia del lavado de la placa. La operación correcta del lavado de la placa es el punto clave en los procedimientos de ELISA;
4) para la incubación en las temperaturas constantes, todas las muestras y reactivo deben evitar la exposición luminosa, y cada microplate se debe sellar por la membrana de la cubierta.

 

6,2 procedimiento de funcionamiento
1) saca todos los reactivo requeridos y guarda en la temperatura ambiente (20-25℃) por lo menos 30min. Observe que cada reactivo se debe sacudir y mezclar mucho antes uso;
2) toma el marco deseado de la tira y de la placa del microwell. Los microplates inusitados se deben resellar y almacenar en 2-8°C;
3) preparación de la solución: Los 40 ml diluídos de 20× concentraron el almacenador intermediario que se lavaba con agua desionizada en el 1:19 (1 porción del almacenador intermediario concentrado 20× del lavado + 19 porciones de agua desionizada), o se preparan según las necesidades;
4) enumeración: Numere los microwells según las muestras y las soluciones estándar; cada muestra y solución estándar se deben hacer dos veces; registre sus posiciones;
5) añade el µL 50 de la muestra o de la solución estándar para separar pozos, y después añade el µL 50 de la solución de trabajo del anticuerpo a cada pozo. Sacuda suavemente para mezclarse bien, cubra el microplate con una película de la cubierta, e incube en 37°C para el minuto 30;
6) lavado el microplate 4-5 veces con 250 µL/well del almacenador intermediario que se lava; empape los pozos en el almacenador intermediario que se lava por 15-30 segundos, y acaricie a seco con el papel absorbente (si algunas burbujas de aire se encuentran después de golpear ligeramente, cortado con una extremidad limpia de la pipeta));
7) añade el µL 100 de la conjugación de la enzima a cada pozo, sacudida y mezcla suavemente, cubierta el microplate con una película de la cubierta, e incuba en 37°C para el minuto 30; vierta el líquido del pozo, lave el microplate con el almacenador intermediario del lavado, y continúe caminando 6).
8) desarrollo del color: Añada el µL 50 el µL de la solución del substrato A y 50 de la solución de B a cada pozo. Sacuda suavemente y mezcla, e incube en 37°C por 15 minutos en la oscuridad para el desarrollo del color;
9) análisis: Añada el µL 50 de la solución de la parada a cada pozo. Sacuda suavemente para mezclarse. Fije la longitud de onda del lector del microplate a 450nm para determinar el valor del OD. (Se recomienda para leer el valor del OD en la longitud de onda dual 450/630nm en el plazo de 5 minutos).

 

7. Juicio del resultado

Hay dos métodos para juzgar los resultados; primer es el juicio áspero, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa. Nota que el valor del OD de la muestra tiene una correlación negativa con el ofOlaquindox contento.

7,1 determinación cualitativa
La gama de concentración (ng/mL) se puede obtener de la comparación el valor medio del OD de la muestra con el de la solución estándar. Si se asume que el valor del OD de la muestraⅠ es 0,3, y el del Ⅱ de la muestra es 1,0, mientras que los de las soluciones estándar están como los seguidores: 2,243 para 0ppb, 1,816 for0.2ppb, 1,415 for0.6ppb, 0,74 for1.8ppb, 0,313 for5.4ppb y 0,155 for16.2ppb, por consiguiente la gama de concentración del Ⅰ is5.4 to16.2ppb de la muestra, y la del Ⅱ is0.6 de la muestra a 1.8ppb.

7,2 determinación cuantitativa
Los valores medios de los valores de la absorción son equivalentes al porcentaje del valor medio del OD (b) de la muestra y de la solución estándar divididas por el valor del OD (B0) de la primera solución estándar (0 estándares) y multiplicadas posteriormente antes de 100%, es decir,

 

Porcentaje del valor de la absorción =	B	el ×100%
	B0

 

Valor del OD de la media de B-the (pozos dobles) de la muestra o de la solución estándar
Valor del OD de la media de B0-the de las 0 soluciones estándar de ng/mL
Dibuje la curva estándar con los porcentajes de la absorción de las soluciones estándar y los valores del semilogarithm de las soluciones estándar de Olaquindox (ng/mL) como la y y X-AXIS, respectivamente. Lea la concentración correspondiente de la muestra de la curva estándar incorporando su porcentaje de la absorción en la curva estándar. El valor resultante es multiplicado posteriormente por el doblez correspondiente del dilución, así finalmente obteniendo la concentración de Olaquindox en la muestra.
Usando analizando el software profesional de este equipo será más conveniente para el análisis exacto y rápido de una gran cantidad de muestras. (Éntrenos en contacto con por favor para este software)

8. Precauciones

1. La temperatura ambiente debajo del ℃ 25 o la temperatura de los reactivo y de las muestras que no son vueltos a la temperatura ambiente (℃ 20-25) llevará a un valor estándar más bajo del OD
2. la sequedad del microplate en el proceso que se lava será acompañada por las situaciones incluyendo las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable
3. la mezcla cada reactivo y mezcla de reacción uniformemente y lavar el microplate a fondo, si no allí será la reproductibilidad indeseable
4. La solución de la parada es la solución ácida sulfúrica de 2 M, evita entrar en contacto con con la piel;
5. ponga el microplate inusitado en un bolso del auto-lacre para resellarlo. La sustancia estándar y el color descolorido anteriores es sensibles a la luz, y no pueden ser expuestos así directamente a la luz
6. No utilice el equipo que excede su fecha de vencimiento. El uso de reactivo diluidos o adulterados de los equipos llevará a los cambios en la sensibilidad y los valores de detección del OD. No intercambie los reactivo de los equipos de diversos números de lote para utilizar
7. deseche la solución de la coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución. El valor de detección de las 0 soluciones estándar de menos de 0,5 indica su degeneración
8. La temperatura óptima de la reacción es el ℃ 37, y las temperaturas demasiado altas o demasiado bajas darán lugar a los cambios en la sensibilidad de detección y valores del OD.

9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento

Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.
Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.
Nota: Si el envasado al vacío del microplate tiene salida, es todavía válido utilizar, no afecta al resultado de la prueba, sea relajarse para utilizar.

 

 

 

 

 

Q1: ¿Cuándo será enviado?
A1: Enviaremos las mercancías para usted cuanto antes en el plazo de 7 días laborables después de recibir el pago. (En caso de factores externos tales como la epidemia, la entrega puede ser retrasada)

 

Q2: ¿Apoya OEM/ODM?
A2: Puede ser apoyado, pero la cantidad específica necesita ser más de 100.000 pedazos, que es conveniente para los productos modificados para requisitos particulares.

 

Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Nacionalmente hemos certificado ISO9001 e ISO13485. Nuestro proceso de producción se ajusta a los procedimientos estándar para asegurar calidad del producto óptima.

 

Q4: ¿Cómo proporcionar el servicio post-venta?
A4: Proporcionamos el servicio post-venta técnico en línea profesional. Podemos proveer de usted la dirección unívoca vía el vídeo, el teléfono, el etc.

 

Q5: ¿Cuál es la forma de pago?
A5: Recibimos el pago por T/T.

 

Q6: ¿Cómo enviar?
A6: Elija el mejor método de envío para usted consiguiendo citas de nuestros muchos portadores cooperativos, y también de la nave según sus requisitos.